Dairy industry Dairy industry Молочная промышленность 1019-8946 70758 10.21603/1019-8946-2023-5-8 Статья ARTICLE Статья Research of methods of DNA extraction from raw milk Исследование методов экстракции ДНК из сырого молока https://orcid.org/0000-0002-8069-9661 Лазарева Екатерина Германовна Lazareva Ekaterina G. https://orcid.org/0009-0007-6106-6088 Хан Алексей Владимирович Khan Aleksej V. https://orcid.org/0000-0001-7852-3790 Фоменко Олег Юрьевич Fomenko Oleg Yu.

кандидат биологических наук;

candidate of sciences in biology;

 Всероссийский научно-исследовательский институт молочной промышленности Москва Россия All-Russian Dairy Research Institute Moscow Russian Federation Всероссийский научно-исследовательский институт молочной промышленности Москва Россия All-Russian Dairy Research Institute Moscow Russian Federation Всероссийский научно-исследовательский институт молочной промышленности Москва Россия All-Russian Dairy Research Institute Moscow Russian Federation 10 10 2023 10 10 2023 5 115 116 05 09 2023 https://moloprom.kemsu.ru/en/nauka/article/70758/view

Изучена эффективность методов выделения ДНК для анализа биобезопасности молока и молочных продуктов методом ПЦР. Некоторые компоненты молока, такие как протеазы и ионы кальция, могут существенно снижать эффективность ПЦР и приводить к искажениям результатов. Проведена количественная (концентрация ДНК) и качественная (амплификация с последующим гель-электрофорезом) оценка коммерческих наборов для выделения ДНК «ДНК-сорб-С-М» и «ДНК-Экстран-2» с точки зрения их пригодности при работе с сырым молоком. Качество и количество полученной с их помощью ДНК позволяет успешно проводить последующий молекулярно-генетический анализ безопасности и подлинности молока.

This article presents the results of work on the study of the effectiveness of various methods of DNA isolation for use in the analysis of biosafety of milk and dairy products by PCR. Some components of milk, such as proteases and calcium ions, can significantly reduce the effectiveness of PCR and lead to distortion of the results. We have given quantitative (DNA concentration) and qualitative assessments (amplification followed by gel electrophoresis) to commercial DNA purification kits «DNA-sorb-S-M» and «DNA-Extran-2». The results obtained indicate the applicability of the selected kits for the isolation of deoxyribonucleic acids from raw milk, the quality and quantity of which allows them to be used for the successful subsequent molecular genetic analysis of the safety and authenticity of milk.

 ДНК полимеразная цепная реакция молоко биобезопасность. DNA polymerase chain reaction milk biosafety.

Пряничникова, Н. С. Матрица маркеров, границы качества и срок годности молочных продуктов / Н. С. Пряничникова, С. А. Хуршудян// Пищевая промышленность. 2023. № 2. С. 49-51. DOI 10.52653 / PPI. 2023.2.2.011 Pryanichnikova, N. S. Matrica markerov, granicy kachestva i srok godnosti molochnyh produktov / N. S. Pryanichnikova, S. A. Hurshudyan// Pischevaya promyshlennost'. 2023. № 2. S. 49-51. DOI 10.52653 / PPI. 2023.2.2.011 Юрова, Е. А. Нормирование показателей качества и идентификационных характеристик молока-сырья / Е. А. Юрова// Молочная промышленность. 2015. № 8. С. 26-28. Yurova, E. A. Normirovanie pokazateley kachestva i identifikacionnyh harakteristik moloka-syr'ya / E. A. Yurova// Molochnaya promyshlennost'. 2015. № 8. S. 26-28. Михайлова, И. Ю. Влияние генетических факторов на продуктивность коров и качество молока / И. Ю. Михайлова [и др.]// Пищевая промышленность. 2021. № 1. С. 36-40. DOI 10.24411 / 0235-2486-2021-10007 Mihaylova, I. Yu. Vliyanie geneticheskih faktorov na produktivnost' korov i kachestvo moloka / I. Yu. Mihaylova [i dr.]// Pischevaya promyshlennost'. 2021. № 1. S. 36-40. DOI 10.24411 / 0235-2486-2021-10007 Bai, X. Rapid and accurate detection for Listeria monocytogenes in milk using ampicillin-mediated magnetic separation coupled with quantitative realtime PCR / X. Bai [et al.]// Microchemical Journal. 2022. V. 183. P. 108063. https://doi.org / 10.1016 / j. microc. 2022.108063 Bai, X. Rapid and accurate detection for Listeria monocytogenes in milk using ampicillin-mediated magnetic separation coupled with quantitative realtime PCR / X. Bai [et al.]// Microchemical Journal. 2022. V. 183. P. 108063. https://doi.org / 10.1016 / j. microc. 2022.108063 Kitpipit, T. Direct-multiplex PCR assay for meat species identification in food products / T. Kitpipit, K. Sittichan, P. Thanakiatkrai// Food Chemistry. 2014. V. 163. P. 77-82. DOI: 10.1016 / j.foodchem. 2014.04.062 Kitpipit, T. Direct-multiplex PCR assay for meat species identification in food products / T. Kitpipit, K. Sittichan, P. Thanakiatkrai// Food Chemistry. 2014. V. 163. P. 77-82. DOI: 10.1016 / j.foodchem. 2014.04.062 Gupta, N. DNA extraction and polymerase chain reaction / N. Gupta// Journal of cytology. 2019. V. 36. № 2. P. 116-117. DOI: 10.4103 / JOC.JOC_110_18 Gupta, N. DNA extraction and polymerase chain reaction / N. Gupta// Journal of cytology. 2019. V. 36. № 2. P. 116-117. DOI: 10.4103 / JOC.JOC_110_18 Sidstedt, M. PCR inhibition in qPCR, dPCR and MPS-mechanisms and solutions / M. Sidstedt, P. Rådström, J. Hedman// Analytical and bioanalytical chemistry. 2020. V. 412. № 9. P. 2009-2023. DOI:10.1007 / 00216-020-02490-2 Sidstedt, M. PCR inhibition in qPCR, dPCR and MPS-mechanisms and solutions / M. Sidstedt, P. Rådström, J. Hedman// Analytical and bioanalytical chemistry. 2020. V. 412. № 9. P. 2009-2023. DOI:10.1007 / 00216-020-02490-2 Powell, H. A. Proteinase inhibition of the detection of Listeria monocytogenes in milk using the polymerase chain reaction / H. A. Powell [et al.]// Letters in Applied Microbiology. 1994. V. 18. № 1. P. 59-61. DOI: 10.1111 / j.1472-765X. 1994. tb00802.x Powell, H. A. Proteinase inhibition of the detection of Listeria monocytogenes in milk using the polymerase chain reaction / H. A. Powell [et al.]// Letters in Applied Microbiology. 1994. V. 18. № 1. P. 59-61. DOI: 10.1111 / j.1472-765X. 1994. tb00802.x Bickley, J. Polymerase chain reaction (PCR) detection of Listeria monocytogenes in diluted milk and reversal of PCR inhibition caused by calcium ions / J. Bickley [et al.]// Letters in Applied Microbiology. 1996. V. 22. № 2. P. 153-158. DOI: 10.1111 / j.1472-765X.1996. tb01131.x Bickley, J. Polymerase chain reaction (PCR) detection of Listeria monocytogenes in diluted milk and reversal of PCR inhibition caused by calcium ions / J. Bickley [et al.]// Letters in Applied Microbiology. 1996. V. 22. № 2. P. 153-158. DOI: 10.1111 / j.1472-765X.1996. tb01131.x