Food Processing: Techniques and Technology Food Processing: Techniques and Technology Техника и технология пищевых производств 2074-9414 2313-1748 6a84bb6894fbba14f785cf9d НАУЧНАЯ СТАТЬЯ RESEARCH ARTICLE НАУЧНАЯ СТАТЬЯ EXPERIENCE OF THE DEPARTMENT OF «BIONANOTECHNOLOGY» OF THE KEMEROVO INSTITUTE OF FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY IN THE FIELD OF BIOTECHNOLOGY OF OBTAINING RECOMBINANT ENZYME PREPARATIONS ОПЫТ КАФЕДРЫ «БИОНАНОТЕХНОЛОГИЯ» КЕМЕРОВСКОГО ТЕХНОЛОГИЧЕСКОГО ИНСТИТУТА ПИЩЕВОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ В ОБЛАСТИ БИОТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНЫХ ФЕРМЕНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ https://orcid.org/0000-0002-5630-3196 Просеков Александр Юрьевич Prosekov Alexander Yu.

доктор технических наук;

doctor of technical sciences;

 https://orcid.org/0000-0002-4921-8997 Бабич Ольга Олеговна Babich Olga O. OOBabich@kantiana.ru

доктор технических наук;

doctor of technical sciences;

 Солдатова Любовь Сергеевна Soldatova L. S. Кемеровский государственный университет Кемерово Россия Kemerovo State University Kemerovo Russian Federation ФГАОУ ВО «Балтийский федеральный университет имени Иммануила Канта» Калининград Россия Immanuel Kant Baltic Federal University Kaliningrad Russian Federation ФГБОУ ВПО «Кемеровский технологический институт пищевой промышленности» Кемерово Россия Kemerovo Institute of Food Science and Technology Kemerovo Russian Federation 102 111 © Просеков А.Ю., Бабич О.О., Солдатова Л.С. © Prosekov A.Y., Babich O.O., Soldatova L.S. Просеков Александр Юрьевич, Бабич Ольга Олеговна, Солдатова Любовь Сергеевна Prosekov Alexander Yu., Babich Olga O., Soldatova L. S. https://jsocnet.ru/en/nauka/publications/6a84bb6894fbba14f785cf9d/view

Проведен обзор современных методов получения рекомбинантных ферментов для пищевой промышлен-ности. Подобраны оптимальные условия получения рекомбинантной L-фенилаланин-аммоний-лиазы Rhodosporidium toruloides, выделенной из Escherichia coli. Доля целевого белка, полученного после индукции, составила 40 % суммарного белка клетки. Проведена очистка полученного белка на Ni-NTA агарозе. Степень очистки белка составила более 90 %.

The review of modern methods of obtaining recombinant enzymes for food industry is given. Optimum condi-tions to obtain recombinant L-phenylalanine-ammonia-lyase Rhodosporidium toruloides allocated from Escherichia coli have been established. The share of the special-purpose protein obtained after the induction was 40 % of the total cell protein. The clearing of the obtained protein on Ni-NTA agarose has been done. The degree of protein clearing was more than 90 %.

 Рекомбинантный штамм фермент клонирование генетическая инженерия конструирование L-фенилаланин-аммоний-лиаза трансформация вектор экспрессии. Recombinant strain enzyme cloning genetic engineering construction L-phenylalanine-ammonia-lyase trans-formation expression vector.

Электронный ресурс: http://www.bioinformatix.ru/interesnoe/ryinok-fermentov-v-ozhidanii-peremen.html Elektronnyy resurs: http://www.bioinformatix.ru/interesnoe/ryinok-fermentov-v-ozhidanii-peremen.html Электронный ресурс: http://abercade.ru/research/industrynews/6059.html Elektronnyy resurs: http://abercade.ru/research/industrynews/6059.html Food-processing enzymes from recombinant microorganisms - a review / Z.S. Olempska-Beer, R.I. Merker, M.D. Ditto, et al // Regulatory toxicology and pharmacology. - 2006. - № 45. - P. 144-158. Food-processing enzymes from recombinant microorganisms - a review / Z.S. Olempska-Beer, R.I. Merker, M.D. Ditto, et al // Regulatory toxicology and pharmacology. - 2006. - № 45. - P. 144-158. Ahmad, S.K. Toxicological studies on lactose oxidase from Microdochium nivale expressed in Fusarium venenatum / S.K. Ahmad, D.S. Brinch, E.P. Friis // Regul. Toxicol. Pharmacol. - 2004. - № 39. - P. 256-270. Ahmad, S.K. Toxicological studies on lactose oxidase from Microdochium nivale expressed in Fusarium venenatum / S.K. Ahmad, D.S. Brinch, E.P. Friis // Regul. Toxicol. Pharmacol. - 2004. - № 39. - P. 256-270. Determining the safety of maltogenic amylase produced by rDNA technology / J.R. Andersen, B.K. Diderichsen, R.K. Hjortkjaer, et al // J. Food Prot. - 1987. - № 50. - Р. 521-526. Determining the safety of maltogenic amylase produced by rDNA technology / J.R. Andersen, B.K. Diderichsen, R.K. Hjortkjaer, et al // J. Food Prot. - 1987. - № 50. - R. 521-526. Van Beilen, J.B. Enzyme technology: an overview / J.B. Van Beilen, Z. Li // Curr. Opin. Biotechnol. - 2002. - № 13. - Р. 338-344. Van Beilen, J.B. Enzyme technology: an overview / J.B. Van Beilen, Z. Li // Curr. Opin. Biotechnol. - 2002. - № 13. - R. 338-344. Barbesgaard, P. On the safety of Aspergillus oryzae: a review / P. Barbesgaard, H.P. Heldt-Hansen, B. Diderichsen // Appl. Microbiol. Biotechnol. - 1992. - № 36. - Р. 569-572. Barbesgaard, P. On the safety of Aspergillus oryzae: a review / P. Barbesgaard, H.P. Heldt-Hansen, B. Diderichsen // Appl. Microbiol. Biotechnol. - 1992. - № 36. - R. 569-572. High level expression of recombinant genes in Aspergillus oryzae / T. Christensen, H. Woeldike, E. Boel, et al // Biotech-nology. - 1988. - № 6. - Р. 1419-1422. High level expression of recombinant genes in Aspergillus oryzae / T. Christensen, H. Woeldike, E. Boel, et al // Biotech-nology. - 1988. - № 6. - R. 1419-1422. The safety assessment of novel foods. Guidelines prepared by ILSI Europe Novel Food Task Force / D.A. Jonas, E. Antignac, J.-M. Antoine, et al // Food Chem. Toxicol. - 1996. - № 34. - Р. 931-940. The safety assessment of novel foods. Guidelines prepared by ILSI Europe Novel Food Task Force / D.A. Jonas, E. Antignac, J.-M. Antoine, et al // Food Chem. Toxicol. - 1996. - № 34. - R. 931-940. Roodveldt, C. Directed evolution of proteins for heterologous expression and stability / C. Roodveldt, A. Aharoni, D.S. Tawfik // Curr. Opin. Struct. Biol. - 2005. - № 15. - Р. 50-56. Roodveldt, C. Directed evolution of proteins for heterologous expression and stability / C. Roodveldt, A. Aharoni, D.S. Tawfik // Curr. Opin. Struct. Biol. - 2005. - № 15. - R. 50-56. Purification, characterization, and heterologous expression in Fusarium venenatum of a novel serine carboxypeptidase from Aspergillus oryzae / A.M. Blinkovsky, T. Byun, K.M. Brown, et al // Appl. Environ. Microbiol. - 1999. - № 65. - Р. 3298-3303. Purification, characterization, and heterologous expression in Fusarium venenatum of a novel serine carboxypeptidase from Aspergillus oryzae / A.M. Blinkovsky, T. Byun, K.M. Brown, et al // Appl. Environ. Microbiol. - 1999. - № 65. - R. 3298-3303. The complete genome sequence of the Gram-positive bacterium Bacillus subtilis / F. Kunst, N. Ogasawara, I. Moszer, et al // Nature. - 1997. - № 390. - Р. 249-256. The complete genome sequence of the Gram-positive bacterium Bacillus subtilis / F. Kunst, N. Ogasawara, I. Moszer, et al // Nature. - 1997. - № 390. - R. 249-256. Cytotoxic potential of industrial strains of Bacillus sp. / P.B. Pedersen, M.E. Bjоrnvad, M.D. Rasmussen, et al // Regul. Toxicol. Pharmacol. - 2002. - № 36. - Р. 155-161. Cytotoxic potential of industrial strains of Bacillus sp. / P.B. Pedersen, M.E. Bjornvad, M.D. Rasmussen, et al // Regul. Toxicol. Pharmacol. - 2002. - № 36. - R. 155-161. De Boer, A.S. On the industrial use of Bacillus licheniformis: a review / A.S. de Boer, F. Priest, B. Diderichsen // Appl. Microbiol. Biotechnol. - 1994. - № 40. - Р. 595-598. De Boer, A.S. On the industrial use of Bacillus licheniformis: a review / A.S. de Boer, F. Priest, B. Diderichsen // Appl. Microbiol. Biotechnol. - 1994. - № 40. - R. 595-598. The complete genome sequence of Escherichia coli K-12 / F.R. Blattner, et al // Science. - 1997. - № 277. - Р. 1453-1462. The complete genome sequence of Escherichia coli K-12 / F.R. Blattner, et al // Science. - 1997. - № 277. - R. 1453-1462. Human safety and genetically modified plants: a review of antibiotic resistance markers and future transformation selection technologies / D.A. Goldstein, B. Tinland, L.A. Gilbertson // J. Appl. Microbiol. - 2005. - № 99. - Р. 7-23. Human safety and genetically modified plants: a review of antibiotic resistance markers and future transformation selection technologies / D.A. Goldstein, B. Tinland, L.A. Gilbertson // J. Appl. Microbiol. - 2005. - № 99. - R. 7-23. Keggins, K.M. Molegular cloning of genetically active fragments of Bacillus DNA in Bacillus subtilis and properties of the vector plasmid pUB110 / K.M. Keggins, P.S. Lovett, E.J. Duvall // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1978. - № 75. - Р. 1423-1427. Keggins, K.M. Molegular cloning of genetically active fragments of Bacillus DNA in Bacillus subtilis and properties of the vector plasmid pUB110 / K.M. Keggins, P.S. Lovett, E.J. Duvall // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1978. - № 75. - R. 1423-1427. The nucleotide sequence of pUB110: some salient features in relation to replication and its regulation / T. McKenzie, T. Hoshino, T. Tanaka, et al // Plasmid. - 1986. - № 15. - Р. 93-103. The nucleotide sequence of pUB110: some salient features in relation to replication and its regulation / T. McKenzie, T. Hoshino, T. Tanaka, et al // Plasmid. - 1986. - № 15. - R. 93-103. Schallmey, M. Developments in the use of Bacillus species for industrial production / M. Schallmey, A. Singh, O.P. Ward // Can. J. Microbiol. - 2004. - № 50. - Р. 1-17. Schallmey, M. Developments in the use of Bacillus species for industrial production / M. Schallmey, A. Singh, O.P. Ward // Can. J. Microbiol. - 2004. - № 50. - R. 1-17. Yanish-Perron, C. Improved M13 phage cloning vectors and host strains: nucleotide sequences of the M13mp18 and pUC19 vectors / C. Yanish-Perron, J. Vieira, J. Messing // Gene. - 1985. - № 33. - Р. 103-119. Yanish-Perron, C. Improved M13 phage cloning vectors and host strains: nucleotide sequences of the M13mp18 and pUC19 vectors / C. Yanish-Perron, J. Vieira, J. Messing // Gene. - 1985. - № 33. - R. 103-119. A novel, high performance enzyme for starch liquefaction. Discovery and optimization of a low pH, thermostable amylase / T.H. Richardson, X. Tan, G. Frey, et al // J. Biol. Chem. - 2002. - № 277. - Р. 26501-26507. A novel, high performance enzyme for starch liquefaction. Discovery and optimization of a low pH, thermostable amylase / T.H. Richardson, X. Tan, G. Frey, et al // J. Biol. Chem. - 2002. - № 277. - R. 26501-26507. Pariza, M.W. Evaluating the safety of microbial enzyme preparations used in food processing: update for a new century / M.W. Pariza, E.A. Johnson // Regul. Toxicol. Pharmacol. - 2001. - № 33. - Р. 173-186. Pariza, M.W. Evaluating the safety of microbial enzyme preparations used in food processing: update for a new century / M.W. Pariza, E.A. Johnson // Regul. Toxicol. Pharmacol. - 2001. - № 33. - R. 173-186. Бабич, О.О. Клонирование и экспрессия гена L-фенилаланин-аммоний-лиазы и характеристика продукта его экс-прессии / О.О. Бабич, Л.С. Солдатова, А.Ю. Просеков // Биотехнология. - 2011. - № 4. - С. 33-39. Babich, O.O. Klonirovanie i ekspressiya gena L-fenilalanin-ammoniy-liazy i harakteristika produkta ego eks-pressii / O.O. Babich, L.S. Soldatova, A.Yu. Prosekov // Biotehnologiya. - 2011. - № 4. - S. 33-39. Бабич, О.О. Выделение, очистка и некоторые свойства рекомбинантной L-фенилаланин-аммоний-лиазы Rhodosporidium toruloides, экспрессированной в клетках E. сoli / О.О. Бабич, Л.С. Солдатова, И.С. Разумникова, А.Ю. Про-секов // Фундаментальные исследования. - 2011. - № 8. - С. 597-602. Babich, O.O. Vydelenie, ochistka i nekotorye svoystva rekombinantnoy L-fenilalanin-ammoniy-liazy Rhodosporidium toruloides, ekspressirovannoy v kletkah E. soli / O.O. Babich, L.S. Soldatova, I.S. Razumnikova, A.Yu. Pro-sekov // Fundamental'nye issledovaniya. - 2011. - № 8. - S. 597-602.