<!DOCTYPE article
PUBLIC "-//NLM//DTD JATS (Z39.96) Journal Publishing DTD v1.4 20190208//EN"
       "JATS-journalpublishing1.dtd">
<article xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" xmlns:xlink="http://www.w3.org/1999/xlink" xmlns:xsi="http://www.w3.org/2001/XMLSchema-instance" article-type="research-article" dtd-version="1.4" xml:lang="en">
 <front>
  <journal-meta>
   <journal-id journal-id-type="publisher-id">Food Processing: Techniques and Technology</journal-id>
   <journal-title-group>
    <journal-title xml:lang="en">Food Processing: Techniques and Technology</journal-title>
    <trans-title-group xml:lang="ru">
     <trans-title>Техника и технология пищевых производств</trans-title>
    </trans-title-group>
   </journal-title-group>
   <issn publication-format="print">2074-9414</issn>
   <issn publication-format="online">2313-1748</issn>
  </journal-meta>
  <article-meta>
   <article-id pub-id-type="publisher-id">47601</article-id>
   <article-id pub-id-type="doi">10.21603/2074-9414-2021-4-733-742</article-id>
   <article-categories>
    <subj-group subj-group-type="toc-heading" xml:lang="ru">
     <subject>ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ</subject>
    </subj-group>
    <subj-group subj-group-type="toc-heading" xml:lang="en">
     <subject>ORIGINAL ARTICLE</subject>
    </subj-group>
    <subj-group>
     <subject>ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ</subject>
    </subj-group>
   </article-categories>
   <title-group>
    <article-title xml:lang="en">Combined Surfactant and Enzyme-Assisted Extraction of Pectin from Hawthorn (Crataegus monogyna Jacq.) Fruits</article-title>
    <trans-title-group xml:lang="ru">
     <trans-title>Оптимизация условий мицеллярно-ферментативной экстракции пектина из плодов боярышника ( Crataegus monogyna Jacq.)</trans-title>
    </trans-title-group>
   </title-group>
   <contrib-group content-type="authors">
    <contrib contrib-type="author">
     <contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0001-8804-2405</contrib-id>
     <name-alternatives>
      <name xml:lang="ru">
       <surname>Новикова</surname>
       <given-names>Анастасия Е.</given-names>
      </name>
      <name xml:lang="en">
       <surname>Novikova</surname>
       <given-names>Anastasia E.</given-names>
      </name>
     </name-alternatives>
     <xref ref-type="aff" rid="aff-1"/>
    </contrib>
    <contrib contrib-type="author">
     <contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0001-6280-1194</contrib-id>
     <name-alternatives>
      <name xml:lang="ru">
       <surname>Скрыпник</surname>
       <given-names>Любовь Н.</given-names>
      </name>
      <name xml:lang="en">
       <surname>Skrypnik</surname>
       <given-names>Liubov N.</given-names>
      </name>
     </name-alternatives>
     <email>LSkrypnik@kantiana.ru</email>
     <xref ref-type="aff" rid="aff-2"/>
    </contrib>
   </contrib-group>
   <aff-alternatives id="aff-1">
    <aff>
     <institution xml:lang="ru">Балтийский федеральный университет имени Иммануила Канта</institution>
     <city>Калининград</city>
     <country>Россия</country>
    </aff>
    <aff>
     <institution xml:lang="en">Immanuel Kant Baltic Federal University</institution>
     <city>Kaliningrad</city>
     <country>Russian Federation</country>
    </aff>
   </aff-alternatives>
   <aff-alternatives id="aff-2">
    <aff>
     <institution xml:lang="ru">Балтийский федеральный университет имени Иммануила Канта</institution>
     <city>Калининград</city>
     <country>Россия</country>
    </aff>
    <aff>
     <institution xml:lang="en">Immanuel Kant Baltic Federal University</institution>
     <city>Kaliningrad</city>
     <country>Russian Federation</country>
    </aff>
   </aff-alternatives>
   <pub-date publication-format="print" date-type="pub" iso-8601-date="2022-01-12T05:22:21+03:00">
    <day>12</day>
    <month>01</month>
    <year>2022</year>
   </pub-date>
   <pub-date publication-format="electronic" date-type="pub" iso-8601-date="2022-01-12T05:22:21+03:00">
    <day>12</day>
    <month>01</month>
    <year>2022</year>
   </pub-date>
   <volume>51</volume>
   <issue>4</issue>
   <fpage>733</fpage>
   <lpage>742</lpage>
   <history>
    <date date-type="received" iso-8601-date="2021-06-11T00:00:00+03:00">
     <day>11</day>
     <month>06</month>
     <year>2021</year>
    </date>
    <date date-type="accepted" iso-8601-date="2021-07-02T00:00:00+03:00">
     <day>02</day>
     <month>07</month>
     <year>2021</year>
    </date>
   </history>
   <self-uri xlink:href="http://fptt.ru/eng/?page=archive&amp;jrn=63&amp;article=8">http://fptt.ru/eng/?page=archive&amp;jrn=63&amp;article=8</self-uri>
   <abstract xml:lang="ru">
    <p>Введение. Большая часть коммерчески доступного пектина выделяется из яблок и цитрусовых. Некоторые виды дикорастущих плодов, в том числе боярышника, отличаются высоким содержанием пектиновых веществ, характеризующихся ценными нутрицевтическими свойствами. Целью исследования стало изучение, моделирование и оптимизация процесса мицеллярно-ферментативной экстракции пектина из плодов боярышника.&#13;
Объекты и методы исследования. Мицеллярно-ферментативную экстракцию из плодов боярышника проводили с использованием 1 % раствора поверхностно-активного вещества Полисорбат-20 и смеси ферментов – целлюлазы и ксиланазы (в соотношении 4:1). Для оптимизации параметров экстракции использовали методологию поверхности отклика с дизайном эксперимента по статистическому плану Бокса-Бенкена. Температуру, время экстракции и модуль варьировали на трех уровнях: 20, 40 и 60 °C, 120, 180 и 240 мин, 15, 30 и 45 мл/г. Влияние параметров на выход пектина оценивали с помощью квадратичной математической модели в виде полиномиального уравнения второго порядка.&#13;
Результаты и их обсуждение. Рассчитаны уравнения регрессии и поверхности отклика, позволяющие предсказывать выход пектина при заданных параметрах экстракции с вероятностью 98,14 %. Установлены оптимальные условия мицеллярно-ферментативной экстракции пектина: температура – 41 °С, время – 160 мин, модуль – 32 мл/г. Расчетный выход пектина в оптимальных условиях составил 14,9 %, экспериментальный – 15,2 ± 0,4 %. Содержание галактуроновой кислоты в выделенном пектине составляло 58,5 %, степень этерификации – 51,5 %. Полученный пектин отличался высокой комплексообразующей способностью по отношению к ионам меди (564 мг Cu2+/г), свинца (254 мг Pb2+/г) и кобальта (120 мг Co2+/г).&#13;
Выводы. Использование мицеллярно-ферментативной экстракции позволяет выделять из плодов боярышника пектин, который может использоваться как в пищевой промышленности, так и для разработки продуктов функционального назначения.</p>
   </abstract>
   <trans-abstract xml:lang="en">
    <p>Introduction. Commercial pectin is usually obtained from apples or citrus fruits. However, some wild fruits, such as hawthorn, are also rich in pectin with valuable nutritional and medical properties. The research objective was to study and improve the process of combined surfactant and enzyme-assisted extraction of pectin from hawthorn fruits.&#13;
Study objects and methods. The study involved a 1% solution of Polysorbate-20 surfactant and a mix of two enzymes, namely cellulase and xylanase, in a ratio of 4:1. The response surface methodology with the Box-Behnken experimental design improved the extraction parameters. The experiment featured three independent variables – temperature, time, and solvent-to-material ratio. They varied at three levels: 20, 40, and 60°C; 120, 180, and 240 min; 15, 30, and 45 mL per g. Their effect on the parameters on the pectin yield was assessed using a quadratic mathematical model based on a second order polynomial equation.&#13;
Results and discussion. The response surface methodology made it possible to derive a second order polynomial regression equation that illustrated the effect of extraction parameters on the yield of polyphenols. The regression coefficient (R2 = 98.14%) and the lack-of-fit test (P &gt; 0.05) showed a good accuracy of the model. The optimal extraction conditions were found as follows: temperature = 41°C, time = 160 min, solvent-to-material ratio = 32 mL per 1 g. Under the optimal conditions, the predicted pectin yield was 14.9%, while the experimental yield was 15.2 ± 0.4%. The content of galacturonic acid in the obtained pectin was 58.5%, while the degree of esterification was 51.5%. The hawthorn pectin demonstrated a good complex-building ability in relation to ions of copper (564 mg Cu2+/g), lead (254 mg Pb2+/g), and cobalt (120 mg Co2+/g).&#13;
Conclusion. Combined surfactant and enzyme-assisted extraction made improved the extraction of pectin from hawthorn fruits. The hawthorn pectin can be used to develop new functional products.</p>
   </trans-abstract>
   <kwd-group xml:lang="ru">
    <kwd>Боярышник</kwd>
    <kwd>пектин</kwd>
    <kwd>галактуроновая кислота</kwd>
    <kwd>этерификация</kwd>
    <kwd>экстракция</kwd>
    <kwd>тяжелые металлы</kwd>
   </kwd-group>
   <kwd-group xml:lang="en">
    <kwd>Hawthorn</kwd>
    <kwd>pectin</kwd>
    <kwd>galacturonic acid</kwd>
    <kwd>esterification</kwd>
    <kwd>extraction</kwd>
    <kwd>heavy metals</kwd>
   </kwd-group>
  </article-meta>
 </front>
 <body>
  <p>ВведениеРазработка функциональных пищевых продуктовс полезными для здоровья свойствами является однойиз основных целей исследований в области пищевыхнаук [1]. В последние несколько десятилетий вниманиерынков к функциональным продуктам, обладающимнутрицевтическими свойствами, т. е. способнымснижать риск развития различных заболеваний,активизировало научные исследования по изучениюи экстракции биологически активных соединений израстений и продуктов растительного происхождения.Фрукты, ягоды и овощи содержат целый комплексразличных питательных фитонутриентов. Ониспособствуют предотвращению сердечно-сосудистых,нейродегенеративных и онкологических заболеваний,вызываемых в том числе развитием в клеткахокислительного стресса [2–4].Помимо культивируемых растений, широкимпотенциалом в качестве источников биологическиактивных соединений обладают лекарственныедикорастущие растения и травы, характеризующиесяполезными для здоровья свойствами, которые хорошоизвестны на протяжении веков [5, 6]. Одним изобщепризнанных лекарственных растений являетсябоярышник (Crataegus spp.). Растения боярышникапредставляют собой разветвленный кустарникили небольшое дерево с колючками и шипами,принадлежащее к семейству Rosaceae и подсемействуRosaceae. Боярышник присутствует во всем мире инасчитывает около 280 видов, среди которых наиболеераспространены Crataegus monogyna, Crataeguslaevigata, Crataegus mexicana и др. [7].Различные части боярышника, в частностиплоды, цветы и листья, богаты питательнымивеществами. Они ассоциируются со многимиполезными для здоровья лекарственными илинутрицевтическими свойствами: антимикробными,противовоспалительными, антиоксидантными,противораковыми и антикоагулянтными [8].В медицине плоды и цветки боярышникаиспользуются как кардиотонические средства,защищающие от стенокардии, гипертонии,сердечной недостаточности, сердечной аритмии,миокардита, артериосклероза, бессонницы ибеспокойства [8, 9]. Лекарственное действие плодови цветков боярышника связано с содержанием вних флавоноидов (преимущественно гиперозида),хлорогеновой и кофейной кислот, тритерпеновыхсапонинов (урсоловой и олеаноловой кислот) [10, 11].Плоды боярышника также богаты пектинами.Пектин – широко используемая пищевая добавка,которая выполняет функции загустителя ижелирующего агента [12]. Пектин боярышникаотличается высокой вязкостью и более эффективенпри образовании и стабилизации эмульсий,чем коммерчески доступный пектин из кожурыцитрусовых [13]. Установлено, что пектиновыеполисахариды и олигосахариды боярышникапроявляют кардиопротекторное действие, включаязащиту сердечно-сосудистой системы, эндотелий-зависимую вазорелаксацию, улучшение коронарногокровообращения и гиполипидемические эффекты [14].К настоящему моменту для экстракции пектина изразличных продуктов растительного происхожденияиспользовались как классические методы (экстракцияминеральными кислотами), так и современные(ультразвуковая, микроволновая и ферментативнаяэкстракция). Ферментативная экстракция, основаннаяare also rich in pectin with valuable nutritional and medical properties. The research objective was to study and improve theprocess of combined surfactant and enzyme-assisted extraction of pectin from hawthorn fruits.Study objects and methods. The study involved a 1% solution of Polysorbate-20 surfactant and a mix of two enzymes, namelycellulase and xylanase, in a ratio of 4:1. The response surface methodology with the Box-Behnken experimental design improvedthe extraction parameters. The experiment featured three independent variables – temperature, time, and solvent-to-materialratio. They varied at three levels: 20, 40, and 60°C; 120, 180, and 240 min; 15, 30, and 45 mL per g. Their effect on theparameters on the pectin yield was assessed using a quadratic mathematical model based on a second order polynomial equation.Results and discussion. The response surface methodology made it possible to derive a second order polynomial regressionequation that illustrated the effect of extraction parameters on the yield of polyphenols. The regression coefficient (R2 = 98.14%)and the lack-of-fit test (P &gt; 0.05) showed a good accuracy of the model. The optimal extraction conditions were found as follows:temperature = 41°С, time = 160 min, solvent-to-material ratio = 32 mL per 1 g. Under the optimal conditions, the predictedpectin yield was 14.9%, while the experimental yield was 15.2 ± 0.4%. The content of galacturonic acid in the obtained pectinwas 58.5%, while the degree of esterification was 51.5%. The hawthorn pectin demonstrated a good complex-building abilityin relation to ions of copper (564 mg Cu2+/g), lead (254 mg Pb2+/g), and cobalt (120 mg Co2+/g).Conclusion. Combined surfactant and enzyme-assisted extraction made improved the extraction of pectin from hawthorn fruits.The hawthorn pectin can be used to develop new functional products.Keywords. Hawthorn, pectin, galacturonic acid, esterification, extraction, heavy metalsFor citation: Novikova AE, Skrypnik LN. Combined surfactant and enzyme-assisted extraction of pectin from hawthorn (Crataegusmonogyna Jacq.) fruits. Food Processing: Techniques and Technology. 2021;51(2):733–742. https://doi.org/10.21603/2074-9414-2021-2-733-742.735Новикова А. Е. [и др.] Техника и технология пищевых производств. 2021. Т. 51. № 4 С. 733–742на использовании ферментативных реакций, врезультате которых разрушается клеточная стенкаи увеличивается проницаемость клеток, обладаетрядом существенных преимуществ перед другимивидами экстракции. Она позволяет повыситьвыход экстракции пектина и может использоватьсяпри низких температурах, снижая потреблениеэнергии [15]. Кроме того, одним из новых подходов вэкстракции фитокомпонентов является использованиеповерхностно-активных веществ (ПАВ). Ониуже успешно использовались для экстракциилектинов, алкалоидов, антрахинонов, изофлавонов,гидроксикоричных кислот, суммы фенольныхсоединений и антиоксидантов [16]. Мицеллы, которыеобразуются при определенной концентрации ПАВ,способны устанавливать химические и физическиевзаимодействия с гидрофильными или липофильнымивеществами. Пектин принадлежит к полисахаридам,которые имеют различную химическую структурус широким диапазоном полярности. Это позволяетпредположить, что применение ПАВ при егоэкстракции также позволит повысить выход пектина израстительного сырья. Анализ имеющихся в литературеданных показал, что ранее для экстракции пектина неприменялась мицеллярно-ферментативная экстракция,включающая использование в качестве экстрагентоврастворов, содержащих как поверхностно-активныевещества, так и ферменты.В связи с этим целью исследования стало изучение,моделирование и оптимизация процесса мицеллярно-ферментативной экстракции пектина из плодовбоярышника с использованием статистическогоплана Бокса-Бенкена.Объекты и методы исследованияВ качестве объектов исследования использовалисьплоды боярышника (Crataegus monogyna Jacq.),которые высушивались в сушильном шкафу (BinderBD 53, Германия) при 60 °С до постоянного веса(массовая доля влаги составляла 7,8 %). Далеевысушенные плоды измельчались до размера частиц0,1 мм и просеивались. Подготовленный материалхранился в плотно закрывающейся емкости прикомнатной температуре.Выделение пектина осуществляли методоммицеллярно-ферментативной экстракции с испо-льзованием поверхностно-активного веществаи ферментов. К навеске (1,00 г) измельченногорастительного материала добавляли от 15 до 45 мл0,05 Н раствора лимонной кислоты, смесь ферментов(целлюлазу и ксиланазу в соотношении 4:1) инеионногенное поверхностно-активное веществоПолисорбат-20 (Tween 20, Е432) с концентрацией1 %. Экстракцию проводили в течение 120–240 мин при температуре от 20 до 60 °С. Исследуемыеконцентрации ПАВ и ферментов были подобраныв предварительных однофакторных экспериментах.Оптимизация параметров (температуры, времении модуля) экстракции пектина проводилась постатистическому 3-х уровневому 3-х факторномуплану Бокса-Бенкена с использованием программногообеспечения Minitab 19 (MINITAB Inc., США).Переменные факторы и уровни их варьированияпри экстракции пектина представлены в таблице 1.Экспериментальный план состоял из 15 опытовс тремя центральными точками. Каждый опытпроводили в трех повторностях. Каждая повторностьпредставляла собой отдельный блок. Экспериментывнутри блока проводились случайным образом, чтобыминимизировать эффекты необъяснимой изменчивостинаблюдаемых ответов из-за посторонних факторов.Для определения оптимальных условий испо-льзовалась квадратичная математическая модель ввиде полиномиального уравнения второго порядка (1):Σ Σ Σ= = &gt; = + + + ki j ij i jki i i iki i Y B X B X B X X 120 1 β (1)где Y – функция отклика; β0, Bii, Bij – коэффициентырегрессии; Xi, Xj – значения параметров эксперимента;k – количество факторов (в данном случае k = 3).Функцией отклика был выход пектина из сырьяв %.Для определения выхода пектина полученныйэкстракт отфильтровывали. Фильтрат разливалипо 15 мл в пробирки объемом 50 мл. Затем вкаждую пробирку, взвешенную заранее, добавляли35 мл 95 % спирта. Подготовленные таким образомпробирки инкубировали при температуре +6 °С втечение 12 ч. По истечении этого времени пробиркиставили центрифугироваться на 25 мин при3900 об/мин (Sigma 3-16P, Германия). Полученныйосадок промывали 70 % спиртом и снова ставилицентрифугироваться в течение 25 мин при3900 об/мин. Операцию повторяли 3 раза. Полученныйпектин высушивали при температуре 60 °C. Выходпектина из сырья определяли гравиметрически ивыражали в процентах (%).Качество полученного пектина оценивали постепени этерификации, массовой доли галактуроновойкислоты и комплексообразующей способности.Степень этерификации определяли титриметрическимметодом [17]. Массовую долю галактуроновойкислоты определяли спектрофотометрическимТаблица 1. Переменные факторыи уровни их варьированияTable 1. Variable factors and their variation levelsОбозначениефактораФактор Уровни−1 0 +1X1 Время, мин 120 180 240X2 Модуль, мл/г 15 30 45X3 Температура, °С 20 40 60736Novikova A.E. et al. Food Processing: Techniques and Technology, 2021, vol. 51, no. 4, pp. 733–742методом, основанном на образовании окрашенногов фиолетово-розовый цвет 5-карбоксифурфуролапродукта реакции уроновых кислот с карбазолом [18].Комплексообразующую способность пектина,выделенного из плодов боярышника, оценивалипо его способности связывать ионы свинца, медии кобальта. Она выражается количеством ионовтяжелого металла, связывающихся с 1 г пектина.Количество связавшихся ионов определяли поразнице между вносимым и остаточным количествомионов [19, 20].Все эксперименты проводили в трех повторностях.Результаты представлены как среднее ± стандартноеотклонение среднего значения (SE).Результаты и их обсуждениеДизайн эксперимента по оптимизацииусловий мицеллярно-ферментативной экстракциипектина из плодов боярышника проводился постатистическому 3-х уровневому 3-х факторномуплану Бокса-Бенкена. Дизайн Бокса-Бенкенаотносится к группе методов, основанных на расчетеповерхностей отклика и позволяющих проводитьисследования по оптимизации условий с наименьшимколичеством экспериментов по сравнению с другимистатистическими подходами [21]. Результатыэксперимента были гомоскедастичны в соответствиис тестом Брауна-Форсайта на гомогенность дисперсии(P ≥ 0,05). Это является обязательным условием дляиспользования метода поверхностей отклика [22].В результате проведенного исследования былополучено полное квадратное полиномиальноерегрессионное уравнение зависимости выходпектина от факторов мицеллярно-ферментативнойэкстракции (2). Коэффициенты в данном уравнениирассчитаны исходя из не кодированных величинпараметров экстракции. Это позволяет, подставляяреальные значения параметра, предсказывать выходапектина при изменении условий экстракции.Таблица 2. Сопоставление результатов полученных на основе уравнения регрессиис экспериментальными значениямиTable 2. Regression equation vs. experimental values№опытаФакторы Экспериментальноезначение Yэксп ± SEРасчетноезначение YрасчПроцентВремя, мин Модуль, мл/г Т, С° отклонения, %1 120 15 40 11,96 ± 0,12 11,99 0,52 240 30 20 14,90 ± 0,18 14,88 0,23 180 30 40 12,73 ± 0,17 12,70 0,44 180 15 20 14,47 ± 0,21 14,46 0,15 180 30 40 12,53 ± 0,23 12,34 2,96 240 30 60 14,60 ± 0,24 14,61 0,17 120 45 40 12,94 ± 0,15 12,97 0,48 120 30 20 14,47 ± 0,07 14,40 0,89 240 15 40 13,16 ± 0,13 13,04 1,710 180 15 60 13,18 ± 0,11 13,14 0,611 240 45 40 13,34 ± 0,16 13,35 0,112 180 45 20 15,00 ± 0,14 14,88 1,313 120 30 60 13,38 ± 0,19 13,53 2,014 180 45 60 14,73 ± 0,23 14,88 1,715 180 30 40 13,18 ± 0,26 13,16 0,8Пектин, % = 6,97 + 0,0090 Х1 + 0,0374 Х2 + 0,3208 Х3 – 0,000088 Х1·Х1 – 0,001381 Х2·Х2 –– 0,004315 Х3·Х3 + 0,000317 Х1·Х2 + 0,000221 Х1·Х3 + 0,000017 Х2·Х3 (2)где Х1 – время, мин; Х2 – модуль, мл/г;Х3 – температура, °С.На основании уравнения были полученырасчетные значения, которые сравнивались сэкспериментальными (средние из трех повторностей).Полученные значения представлены в таблице 2.На основании данных таблицы 2 был проведендисперсионный анализ (ANOVA). Данныйстатистический метод был использован дляпроверки гипотез о значимости факторов выбраннойматематической модели [21, 22]. Результатыдисперсионного анализа представлены в таблице 3.Сравнение экспериментальных и расчетныхзначений было проведено с помощью коэффициентадетерминации R2, а также значения P теста lack-offit.Суммарной мерой общего качества уравнения737Новикова А. Е. [и др.] Техника и технология пищевых производств. 2021. Т. 51. № 4 С. 733–742регрессии соответствия его статистическим данными основной характеристикой прогностическойсилы выбранной модели является коэффициентдетерминации R2. Значение P теста lack-of-fitпоказывает соответствие экспериментальныхданных своей математической модели. ЕслиP теста lack-of-fit принимает значения больше 0,05,то опытные данные соответствуют проверяемоймодели. Сравнение экспериментального и модельногоотклика представлено на рисунке 1. ЗначенияR2 = 0,9814 и Plack-of-fit = 0,246 подтверждаютсоответствие данных математической модели и еевозможность объяснить 98,14 % дисперсии [23].На основе уравнения регрессии построеныповерхности отклика, которые отражают влияниеисследуемых переменных на выход пектина приего экстракции из плодов боярышника (рис. 2 a–c).Светлой областью отмечены максимальные значениявыхода пектина.На рисунке 2a показано влияние времениэкстракции и модуля на выход пектина.Экстракционный выход повышался с увеличениемвремени экстракции, достигая максимума при160 мин. Анализ поверхностей отклика (рис. 2a, c) ирезультатов дисперсионного анализа (табл. 3) показал,что модуль, т. е. отношение объема растворителя наединицу навески, влиял на выход пектина в меньшейстепени по сравнению с другими параметрами.Значимое влияние оказывал только квадрат этогофактора. Ранее в ряде работ было показано, что времяэкстракции пектина обуславливает эффективностьпроцесса. При этом длительность процесса зависитот способа экстракции и вида растительногопродукта [24].Из рисунка 2b и 2c видно, что температура имелаположительный линейный эффект и отрицательныйквадратичный эффект на эффективность экстракциипектина из плодов боярышника. Самые высокиезначения выхода были получены в средней точке.Повышение температуры до 40 °С увеличивалоэффективность экстракции пектина. Однакодальнейшее увеличение этого параметра не приводилок увеличению его выхода. Температура являетсяТаблица 3. Результаты дисперсионного анализа исследуемых параметров экстракцииTable 3. Results of analysis of variance of the studied extraction parametersИсточник вариации Сумма квадратов Средний квадрат F-критерий Фишера Р-критерийМодель 13,4227 1,4914 34,37 0,001Линейная 1,5931 0,5310 12,24 0,010X1 0,5202 0,5202 61,75 0,018X2 0,2665 0,2665 0,71 0,056X3 0,8065 0,8065 73,52 0,008Квадратичная 11,2237 3,7412 86,22 0,000X1·X1 0,3683 0,3683 262,38 0,033X2·X2 0,3567 0,3567 560,20 0,035X3·X3 10,9975 10,9975 393,52 &lt; 0,001С учетом взаимного влияния 2-х факторов 0,6059 0,2020 4,65 0,065X1·X2 0,3249 0,3249 0,77 0,041X1·X3 0,2809 0,2809 109,48 0,052X2·X3 0,0001 0,0001 33,21 0,964Ошибка 0,2170 0,0434 – –Тест lack-of-fit 0,1797 0,0599 3,21 0,246Коэффициент детерминации, R2 0,9814Рисунок 1. Сравнение экспериментальных имодельных откликов при мицеллярно-ферментативнойэкстракции пектина из плодов боярышникаFigure 1. Experimental and model responses during enzymeassistedextraction of pectin from hawthorn fruitsR2738Novikova A.E. et al. Food Processing: Techniques and Technology, 2021, vol. 51, no. 4, pp. 733–742важнейшим фактором, влияющим на выход пектинапри экстракции [25]. Как правило, при оптимизациитемпературного режима кислотной экстракциипектина из продуктов растительного происхожденияисследуются высокие температуры (в пределах от40–50 до 80–90 °С). Большинство коммерческихпектинов экстрагируют горячими кислотами (HClили HNO3) при повышенной температуре ~ 85 °C [26].Использование поверхностно-активного веществасовместно с ферментами позволило добитьсямаксимального выхода пектина при низкихтемпературах.На основе проведенного анализа поверхностейотклика были определены оптимальные параметрыэкстракции, использование которых приводитк максимальному выходу пектина из плодовбоярышника. Результаты анализа представлены втаблице 4.Из данных, представленных в таблице 4, видно,что оптимальными являются следующие значенияпараметров: температура – 41 °С; время – 160 мин;модуль – 32 мл/г. При заданных параметрах расчетныйвыход пектина составлял 14,9 %. Для валидацииполученных результатов был проведен эксперимент повыделению пектина при указанных выше оптимальныхпараметрах. Выход пектина составил 15,2 ± 0,4 %(n = 5). Значимых различий между экспери-ментальными и прогнозируемым значениямивыявлено не было (P &gt; 0,05). Это доказало хорошуюпрогностическую способность математической моделии ее пригодность для оптимизации мицеллярно-cРисунок 2. Поверхность отклика, отражающая зависимость содержания пектина от:a – времени и модуля; b – времени и температуры; c – модуля и температурыFigure 2. Response surface: effect of a – time and module; b – time and temperature; c – module and temperature on pectin contenta bТаблица 4. Выбор оптимальных параметровмицеллярно-ферментативной экстракции пектинаиз боярышникаTable 4. Optimal parameters for enzyme-assisted extractionof pectin from hawthornПараметры Время,минМодуль,мл/гТемпература,°СВерхний уровень 240 45 60Оптимум 160 32 41Нижний уровень 120 15 20Пектина, %Т, °СМ одуль, мл/гПектина, %Т, °СМ одуль, мл/гПектина, %Т, °СМодуль, мл/г739Новикова А. Е. [и др.] Техника и технология пищевых производств. 2021. Т. 51. № 4 С. 733–742ферментативной экстракции пектина из плодовбоярышника.Полученный при оптимальных параметрахэкстракции пектин проверялся по основнымпараметрам качества: массовая доля галактуроновойкислоты, степень этерификации и способностьсвязываться с ионами тяжелых металлов (Cu2+, Pb2+,Co2+). Результаты анализов представлены в таблице 5.Полученные образцы пектина были лишены запаха,имели бежево-коричневатый цвет. Исследованиесодержания галактуроновой кислоты в образцахпектина, выделенного из плодов боярышникамицеллярно-ферментативной экстракцией, пока-зало, что массовая доля галактуроновой кислотысоставляла 58,5 %. Коммерческие образцыпектина характеризуются высоким содержаниемгалактуроновой кислоты (более 65 %). Полученноеотносительно низкое значение содержаниягалактуроновой кислоты в выделенном приоптимальных условиях пектине связано с пониженнойтемпературой, при которой проводилась мицеллярно-ферментативная экстракция. Ранее было показано,что температура экстракции напрямую влияет накачественные показатели пектина. В работе J. Chenи др. установлено, что пектин, экстрагируемый изцитрусов при температуре 40 °С и ниже, содержит в1,3 раз меньше галактуровой кислоты, по сравнениюс пектином, выделенным при 85 °С [26]. Однакополученный при низких температурах пектинотличается высокой вязкостью, сохранениемразветвленных остатков нейтральных сахаров вструктуре и проявляет высокую биологическуюактивность.Степень этерификации представляет собойотношение числа этерифицированных карбоксильныхгрупп к общему содержанию карбоксильныхгрупп в пектине. Степень этерификации влияет нажелирование пектина. Поэтому пектины делятся надве категории: низкоэтерифицированный (степеньэтерификации &lt; 50 %) и высокоэтерифицированный(степень этерификации &gt; 50 %) [27]. Разные формыпектина имеют различное применение. Пектин свысоким содержанием метоксильных групп образуетгели при нагревании в кислых растворах с низкимpH (2,0–3,5) и в присутствии высоких концентрацийсахара (55–75 %). Низкоэтерифицированный пектинможет образовывать гель в широком диапазоне pH(2–6) с небольшим количеством сахара или без него вприсутствии двухвалентных ионов, таких как кальций(Ca2+) [15]. В образце пектина, выделенного из плодовбоярышника, степень этерификации составила 51,5 %.Это говорит о том, что формально полученныйпектин является высокоэтерифицированным.Однако на практике в пищевой промышленностиобычно используются только пектины со степеньюэтерификации более 60 %. При рассмотрении вопросао возможностях применения пектина из боярышникаследует учитывать, что пектины со степеньюэтерификации менее 60 % являются хорошимикомплексообразователями, способными связыватьионы тяжелых и радиоактивных металлов и выводитьих из организма [28].Результаты проведенных анализов по оценкекомплексообразующей способности пектина,выделенного из плодов боярышника, показали, чтоон отличался высокой способностью связывать ионымеди (564 мг Cu2+/г), свинца (254 мг Pb2+/г) и кобальта(120 мг Co2+/г). В работе М. Ю. Тамовой и др. былопоказано, что комплексообразующая способностьсвекловичного пектина составляет от 2 до 40 мг Cu2+/ги от 3 до 40 мг Co2+/г, яблочного – от 3,5 до 50 мгCu2+/г и от 2,5 до 40 мг Co2+/г в зависимости от pH истепени этерификации [19]. В работе Л. П. Мыкоц идр. исследовалась комплексообразующая способностьпектина, выделенного из калины, по отношению кионам свинца [20]. Авторами установлено, что 1 гпектина из калины способен связывать до 194 мг Pb2+.Таким образом, выделенный в результатемицеллярно-ферментативной экстракции пектиниз плодов боярышника можно рекомендовать вдиетическом питании тем, кому приходится работатьс тяжелыми металлами. С другой стороны, степеньэтерификации полученного пектина (51,5 %) позволяетего рекомендовать для использования и в пищевойпромышленности. Например, при изготовлениикондитерских изделий и выпечки желейныхтортов, а также при приготовлении мармеладов ибезалкогольных напитков. Продукты с высокимизначениями комплексообразования катионов тяжелыхметаллов можно будет отнести к функциональнымпродуктам, характеризующимся лечебными ипрофилактическими свойствами.ВыводыВ ходе проведенного исследования былоустановлено, что применение мицеллярно-Таблица 5. Выбор оптимальных параметровмицеллярно-ферментативной экстракции пектинаиз боярышникаTable 5. Optimal parameters for enzyme-assisted extractionof pectin from hawthornПоказатель ЗначениеМассовая доля галактуроновой кислоты, % 58,5 ± 1,2Степень этерификации, % 51,5 ± 0,7Комплексообразующая способность поотношению к ионам Cu2+ , мг Cu2+/г564,0 ± 7,6Комплексообразующая способность поотношению к ионам Pb2+, мг Pb2+/г253,8 ± 4,4Комплексообразующая способность поотношению к ионам Co2+, мг Co2+/г120,4 ± 3,1740Novikova A.E. et al. Food Processing: Techniques and Technology, 2021, vol. 51, no. 4, pp. 733–742ферментативной экстракции с использованием смесиферментов (целлюлазы и ксиланазы в соотношении4:1) и ПАВ (1 % раствора Полисорбата-20)позволяет эффективно экстрагировать пектин избоярышника без использования дополнительногооборудования (ультразвуковых и микроволновыхустановок) с хорошим выходом целевого продукта.Полученное в ходе работы регрессионное уравнениеэкстракционного процесса, показывающееколичественное влияние каждого фактора навыход пектина в процессе экстракции, позволяетуправлять этим процессом и добиваться наибольшейэффективности. Полученный из боярышникапектин может использоваться как в пищевойпромышленности, так и для разработки продуктовфункционального назначения.Критерии авторстваА. Е. Новикова – проведение экспериментальныхисследований, обработка данных, подготовкапервоначального варианта рукописи. Л. Н. Скрыпник –организация и руководство исследованиями,разработка методологии эксперимента, написаниерукописи.Конфликт интересовАвторы заявляют об отсутствии конфликтаинтересов.</p>
 </body>
 <back>
  <ref-list>
   <ref id="B1">
    <label>1.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Bioactive compounds from date fruit and seed as potential nutraceutical and functional food ingredients / S. Maqsood [et al.] // Food Chemistry. 2020. Vol. 308. https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2019.125522.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Maqsood S, Adiamo O, Ahmad M, Mudgil P. Bioactive compounds from date fruit and seed as potential nutraceutical and functional food ingredients. Food Chemistry. 2020;308. https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2019.125522.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B2">
    <label>2.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Therapeutic potential of natural antioxidants / K. V. Ramana [et al.] // Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2018. Vol. 2018. https://doi.org/10.1155/2018/9471051.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Ramana KV, Reddy ABM, Ravi Kumar Majeti NV, Singhal SS. Therapeutic potential of natural antioxidants. Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2018;2018. https://doi.org/10.1155/2018/9471051.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B3">
    <label>3.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Durazzo A., Lucarini M. Editorial: The state of science and innovation of bioactive research and applications, health and diseases // Frontiers in Nutrition. 2019. Vol. 6. https://doi.org/10.3389/fnut.2019.00178.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Durazzo A, Lucarini M. Editorial: The state of science and innovation of bioactive research and applications, health and diseases. Frontiers in Nutrition. 2019;6. https://doi.org/10.3389/fnut.2019.00178.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B4">
    <label>4.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Abelmoschus esculentus (L.): Bioactive components’ beneficial properties - focused on antidiabetic role - for sustainable health applications / A. Durazzo [et al.] // Molecules. 2019. Vol. 24. № 1. https://doi.org/10.3390/molecules24010038.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Durazzo A, Lucarini M, Novellino E, Souto EB, Daliu P, Santini A. Abelmoschus esculentus (L.): Bioactive com-ponents’ beneficial properties - focused on antidiabetic role - for sustainable health applications. Molecules. 2019;24(1). https://doi.org/10.3390/molecules24010038.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B5">
    <label>5.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Molecules from nature: Reconciling biodiversity conservation and global healthcare imperatives for sustainable use of medicinal plants and fungi / M.-J. R. Howes [et al.] // Plants People Planet. 2020. Vol. 2. № 5. P. 463-481. https://doi.org/10.1002/ppp3.10138.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Howes M-JR, Quave CL, Collemare J, Tatsis EC, Twilley D, Lulekal E, et al. Molecules from nature: Reconciling biodiversity conservation and global healthcare imperatives for sustainable use of medicinal plants and fungi. Plants People Planet. 2020;2(5):463-481. https://doi.org/10.1002/ppp3.10138.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B6">
    <label>6.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">In vitro and in vivo evaluation of antioxidant properties of wild-growing plants. A short review / R. C. Fierascu [et al.] // Current Opinion in Food Science. 2018. Vol. 24. P. 1-8. https://doi.org/10.1016/j.cofs.2018.08.006.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Fierascu RC, Ortan A, Fierascu IC, Fierascu I. In vitro and in vivo evaluation of antioxidant properties of wild-growing plants. A short review. Current Opinion in Food Science. 2018;24:1-8. https://doi.org/10.1016/j.cofs.2018.08.006.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B7">
    <label>7.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Characterization of hawthorn (Crataegus spp.) genotypes by SSR markers / M. Güney [et al.] // Physiology and Molecular Biology of Plants. 2018. Vol. 24. № 6. P. 1221-1230. https://doi.org/10.1007/s12298-018-0604-6.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Güney M, Kafkas S, Keles H, Aras S, Ercişli S. Characterization of hawthorn (Crataegus spp.) genotypes by SSR markers. Physiology and Molecular Biology of Plants. 2018;24(6):1221-1230. https://doi.org/10.1007/s12298-018-0604-6.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B8">
    <label>8.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Hawthorn (Crataegus spp.): An updated overview on its beneficial properties / A. Nazhand [et al.] // Forests. 2020. Vol. 11. № 5. https://doi.org/10.3390/f11050564.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Nazhand A, Lucarini M, Durazzo A, Zaccardelli M, Cristarella S, Souto SB, et al. Hawthorn (Crataegus spp.): An updated overview on its beneficial properties. Forests. 2020;11(5). https://doi.org/10.3390/f11050564.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B9">
    <label>9.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Cloud A., Vilcins D., McEwen B. The effect of hawthorn (Crataegus spp.) on blood pressure: A systematic re-view // Advances in Integrative Medicine. 2020. Vol. 7. № 3. P. 167-175. https://doi.org/10.1016/j.aimed.2019.09.002.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Cloud A, Vilcins D, McEwen B. The effect of hawthorn (Crataegus spp.) on blood pressure: A systematic review. Advances in Integrative Medicine. 2020;7(3):167-175. https://doi.org/10.1016/j.aimed.2019.09.002.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B10">
    <label>10.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Physicochemical characterization, antioxidant activity, and phenolic compounds of hawthorn (Crataegus spp.) fruits species for potential use in food applications / A. Alirezalu [et al.] // Foods. 2020. Vol. 9. № 4. https://doi.org/10.3390/foods9040436.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Alirezalu A, Ahmadi N, Salehi P, Sonboli A, Alirezalu K, Khaneghah AM, et al. Physicochemical characteriza-tion, antioxidant activity, and phenolic compounds of hawthorn (Crataegus spp.) fruits species for potential use in food applications. Foods. 2020;9(4). https://doi.org/10.3390/foods9040436.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B11">
    <label>11.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Primary, secondary metabolites and molecular characterization of hawthorn (Crataegus spp.) genotypes / A. Gurlen [et al.] // Agronomy. 2020. Vol. 10. № 11. https://doi.org/10.3390/agronomy10111731.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Gurlen A, Gundogdu M, Ozer G, Ercisli S, Duralija B. Primary, secondary metabolites and molecular characteri-zation of hawthorn (Crataegus spp.) genotypes. Agronomy. 2020;10(11). https://doi.org/10.3390/agronomy10111731.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B12">
    <label>12.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Emerging concepts in the nutraceutical and functional properties of pectin - A Review / F. Naqash [et al.] // Car-bohydrate Polymers. 2017. Vol. 168. P. 227-239. https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2017.03.058.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Naqash F, Masoodi FA, Rather SA, Wani SM, Gani A. Emerging concepts in the nutraceutical and functional properties of pectin - A Review. Carbohydrate Polymers. 2017;168:227-239. https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2017.03.058.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B13">
    <label>13.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Physicochemical characterisation of hawthorn pectins and their performing in stabilising oil-in-water emulsions / J. C. Cuevas-Bernardino [et al.] // Reactive and Functional Polymers. 2016. Vol. 103. P. 63-71. https://doi.org/10.1016/j.reactfunctpolym.2016.03.024.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Cuevas-Bernardino JC, Lobato-Calleros C, Román-Guerrero A, Alvarez-Ramirez J, Vernon-Carter EJ. Physico-chemical characterisation of hawthorn pectins and their performing in stabilising oil-in-water emulsions. Reactive and Functional Polymers. 2016;103:63-71. https://doi.org/10.1016/j.reactfunctpolym.2016.03.024.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B14">
    <label>14.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Extraction and isolation of pectin rich in homogalacturonan domains from two cultivars of hawthorn berry (Crataegus pinnatifida) / L. Roman [et al.] // Food Hydrocolloids. 2021. Vol. 113. https://doi.org/10.1016/j.foodhyd.2020.106476.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Roman L, Guo M, Terekhov A, Grossutti M, Vidal NP, Reuhs BL, et al. Extraction and isolation of pectin rich in homogalacturonan domains from two cultivars of hawthorn berry (Crataegus pinnatifida). Food Hydrocolloids. 2021;113. https://doi.org/10.1016/j.foodhyd.2020.106476.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B15">
    <label>15.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">An overview of the traditional and innovative approaches for pectin extraction from plant food wastes and by-products: Ultrasound-, microwaves-, and enzyme-assisted extraction / M. Marić [et al.] // Trends in Food Science and Technology. 2018. Vol. 76. P. 28-37. https://doi.org/10.1016/j.tifs.2018.03.022.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Marić M, Grassino AN, Zhu Z, Barba FJ, Brnčić M, Rimac Brnčić S. An overview of the traditional and innova-tive approaches for pectin extraction from plant food wastes and by-products: Ultrasound-, microwaves-, and enzyme-assisted extraction. Trends in Food Science and Technology. 2018;76:28-37. https://doi.org/10.1016/j.tifs.2018.03.022.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B16">
    <label>16.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Skrypnik L., Novikova A. Response surface modeling and optimization of polyphenols extraction from apple pomace based on nonionic emulsifiers // Agronomy. 2020. Vol. 10. № 1. https://doi.org/10.3390/agronomy10010092.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Skrypnik L, Novikova A. Response surface modeling and optimization of polyphenols extraction from apple pomace based on nonionic emulsifiers. Agronomy. 2020;10(1). https://doi.org/10.3390/agronomy10010092.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B17">
    <label>17.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Pistachio green hull pectin: Optimization of microwave-assisted extraction and evaluation of its physicochemi-cal, structural and functional properties / M. Kazemi [et al.] // Food Chemistry. 2019. Vol. 271. P. 663-672. https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2018.07.212.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Kazemi M, Khodaiyan F, Labbafi M, Saeid Hosseini S, Hojjati M. Pistachio green hull pectin: Optimization of microwave-assisted extraction and evaluation of its physicochemical, structural and functional properties. Food Chem-istry. 2019;271:663-672. https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2018.07.212.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B18">
    <label>18.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Efficient extraction of pectin from sisal waste by combined enzymatic and ultrasonic process / Y. Yang [et al.] // Food Hydrocolloids. 2018. Vol. 79. P. 189-196. https://doi.org/10.1016/j.foodhyd.2017.11.051.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Yang Y, Wang Z, Hu D, Xiao K, Wu J-Y. Efficient extraction of pectin from sisal waste by combined enzymatic and ultrasonic process. Food Hydrocolloids. 2018;79:189-196. https://doi.org/10.1016/j.foodhyd.2017.11.051.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B19">
    <label>19.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Тамова М. Ю., Починок Т. Б., Булыгина Г. С. Оценка связывающей способности различных пектинов по отношению к ионам меди и кобальта // Известия высших учебных заведений. Пищевая технология. 2002. Т. 267-268. № 2-3. С. 23-24.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Tamova MYu, Pochinok TB, Bulygina GS. Otsenka svyazyvayushchey sposobnosti razlichnykh pektinov po otnosheniyu k ionam medi i kobalʹta [Evaluating the binding capacity of various pectins in relation to copper and cobalt ions]. News of Institutes of Higher Education. Food Technology. 2002;267-268(2-3):23-24. (In Russ.).</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B20">
    <label>20.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Мыкоц Л. П., Романцова Н. А., Гущина А. В. Изучение сорбционной способности пектина, выделенного из плодов калины обыкновенной, по отношению к ионам свинца // Фундаментальные исследования. 2013. № 3-1. С. 197-200.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Mykots LP, Romantsova NA, Gushchina AV. Research of the pectin isolated from fresh fruits of cranberry high for sorption ability in relation to ion of lead. Fundamental research. 2013;(3-1):197-200. (In Russ.).</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B21">
    <label>21.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Box-Behnken design based statistical modeling for the extraction and physicochemical properties of pectin from sunflower heads and the comparison with commercial low-methoxyl pectin / X. Peng [et al.] // Scientific Reports. 2020. Vol. 10. № 1. https://doi.org/10.1038/s41598-020-60339-1.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Peng X, Yang G, Shi Y, Zhou Y, Zhang M, Li S. Box-Behnken design based statistical modeling for the extrac-tion and physicochemical properties of pectin from sunflower heads and the comparison with commercial low-methoxyl pectin. Scientific Reports. 2020;10(1). https://doi.org/10.1038/s41598-020-60339-1.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B22">
    <label>22.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Elsayed N., Hammad K. S. M., Abd El-Salam E. A. E.-S. Plum (Prunus domestica L.) leaves extract as a natural antioxidant: Extraction process optimization and sunflower oil oxidative stability evaluation // Journal of Food Pro-cessing and Preservation. 2020. Vol. 44. № 10. https://doi.org/10.1111/jfpp.14813.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Elsayed N, Hammad KSM, Abd El-Salam EAE-S. Plum (Prunus domestica L.) leaves extract as a natural antioxidant: Extraction process optimization and sunflower oil oxidative stability evaluation. Journal of Food Pro-cessing and Preservation. 2020;44(10). https://doi.org/10.1111/jfpp.14813.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B23">
    <label>23.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Box-Behnken design based multi-response analysis and optimization of supercritical carbon dioxide extraction of bioactive flavonoid compounds from tea (Camellia sinensis L.) leaves / J. P. Maran [et al.] // Journal of Food Science and Technology. 2015. Vol. 52. № 1. P. 92-104. https://doi.org/10.1007/s13197-013-0985-z.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Maran JP, Manikandan S, Priya B, Gurumoorthi P. Box-Behnken design based multi-response analysis and op-timization of supercritical carbon dioxide extraction of bioactive flavonoid compounds from tea (Camellia sinensis L.) leaves. Journal of Food Science and Technology. 2015;52(1):92-104. https://doi.org/10.1007/s13197-013-0985-z.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B24">
    <label>24.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Dao T. A. T., Webb H. K., Malherbe F. Optimization of pectin extraction from fruit peels by response surface method: Conventional versus microwave-assisted heating // Food Hydrocolloids. 2021. Vol. 113. https://doi.org/10.1016/j.foodhyd.2020.106475.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Dao TAT, Webb HK, Malherbe F. Optimization of pectin extraction from fruit peels by response surface method: Conventional versus microwave-assisted heating. Food Hydrocolloids. 2021;113. https://doi.org/10.1016/j.foodhyd.2020.106475.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B25">
    <label>25.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Dynamic modelling of pectin extraction describing yield and functional characteristics / N. M. Andersen [et al.] // Journal of Food Engineering. 2017. Vol. 192. P. 61-71. https://doi.org/10.1016/j.jfoodeng.2016.08.006.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Andersen NM, Cognet T, Santacoloma PA, Larsen J, Armagan I, Larsen FH, et al. Dynamic modelling of pectin extraction describing yield and functional characteristics. Journal of Food Engineering. 2017;192:61-71. https://doi.org/10.1016/j.jfoodeng.2016.08.006.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B26">
    <label>26.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Extraction temperature is a decisive factor for the properties of pectin / J. Chen [et. al.] // Food Hydrocolloids. 2021. Vol. 112. https://doi.org/10.1016/j.foodhyd.2020.106160.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Chen J, Cheng H, Zhi Z, Zhang H, Linhardt RJ, Zhang F, et al. Extraction temperature is a decisive factor for the properties of pectin. Food Hydrocolloids. 2021;112. https://doi.org/10.1016/j.foodhyd.2020.106160.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B27">
    <label>27.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Rapid enzymatic method for pectin methyl esters determination / L. Łękawska-Andrinopoulou [et al.] // Journal of Analytical Methods in Chemistry. 2013. Vol. 2013. https://doi.org/10.1155/2013/854763.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Łękawska-Andrinopoulou L, Vasiliou EG, Georgakopoulos DG, Yialouris CP, Georgiou CA. Rapid enzymatic method for pectin methyl esters determination. Journal of Analytical Methods in Chemistry. 2013;2013. https://doi.org/10.1155/2013/854763.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
   <ref id="B28">
    <label>28.</label>
    <citation-alternatives>
     <mixed-citation xml:lang="ru">Ptichkina N. M., Markina O. A., Rumyantseva G. N. Pectin extraction from pumpkin with the aid of microbial enzymes // Food Hydrocolloids. 2008. Vol. 22. № 1. P. 192-195. https://doi.org/10.1016/j.foodhyd.2007.04.002.</mixed-citation>
     <mixed-citation xml:lang="en">Ptichkina NM, Markina OA, Rumyantseva GN. Pectin extraction from pumpkin with the aid of microbial en-zymes. Food Hydrocolloids. 2008;22(1):192-195. https://doi.org/10.1016/j.foodhyd.2007.04.002.</mixed-citation>
    </citation-alternatives>
   </ref>
  </ref-list>
 </back>
</article>
